نقش شرایط مختلف تجمع آنزیم هگزوکیناز نوع b مخمر در ساختار و سمیت آن روی سلول ها

نویسندگان

حسن رامشینی

چکیده

زمینه و هدف: تشکیل رسوبات پروتئینی آمیلوئیدی از ویژگی های مشترک گروهی از بیماری های وابسته به آمیلوئید از جمله آلزایمر، پارکینسون، دیابت نوع ii و پریون می باشد. نوع تجمعات تشکیل شده در شرایط مختلف و مکانیزم تخریب عملکرد سلولی توسط این تجمعات، هنوز کاملاً مشخص نیست. در مطالعه حاضر توانایی هگزوکیناز نوع b مخمر (yhkb) برای تشکیل تجمعات منظم آمیلوئیدی و یا بی شکل در شرایط گوناگون و سمیت این تجمعات روی سلول ها مورد بررسی قرار گرفته است. مواد و روش ها: در این مطالعه تجربی برای القای آمیلوئید از سه روش مرسوم ایجاد آمیلوئید استفاده شد. این روش ها شامل قرار دادن (1) yhkb در ph اسیدی، دمای 55 درجه ولی با هم زدن مداوم، (2) در ph اسیدی در حضور نمک و در دمای آزمایشگاه بدون هم زدن مداوم و (3) در حضور تری فلوئور و اتانول (tfe) بودند. نوع تجمعات تشکیل یافته در شرایط فوق به وسیله توانایی شان برای اتصال با رنگ تیوفلاوین t (شاخص آمیلوئید) و شکل تجمعات با عکس برداری به وسیله میکروسکوپ نیروی اتمی بررسی شد. همچنین سمیت تجمعات تشکیل یافته در شرایط ذکر شده، به وسیله اثر دادن آن ها روی سلول های نروبلاستومای انسانی sh-sy5y و از طریق روش احیای mtt مقایسه شد. یافته ها: تجمعات ایجاد شده در هر سه شرایط، توانایی اتصال به تیوفلاوین t (tht) را داشتند ولی میزان اتصالشان متفاوت بود. عکس های میکروسکوپ نیروی اتمی (afm) و الکترونی عبوری (tem) نیز نشان داد که ساختارهای ایجاد شده از نظر ظاهری کاملاً با هم متفاوتند. تجمعات بی شکل و نامنظم این آنزیم هم برای مقایسه با تجمعات منظم به دست آمد. سنجش سمیت به وسیله روش احیای mtt نشان داد که تجمعات بی شکل در مقایسه با کنترل سمیتی برای سلول های نوروبلاستوما نداشتند ولی تجمعات حاصله در هر سه روش مذکور باعث تخریب سلول ها با شدت های متفاوت شدند. نتیجه گیری: بر اساس یافته های این پژوهش، اختلاف در سمیت مشاهده شده تجمعات را می توان به اختلاف در مورفولوژی تجمعات تولیدی در شرایط مختلف و مکانیزم عمل متفاوت آن ها روی سلول ها نسبت داد.

برای دانلود باید عضویت طلایی داشته باشید

برای دانلود متن کامل این مقاله و بیش از 32 میلیون مقاله دیگر ابتدا ثبت نام کنید

اگر عضو سایت هستید لطفا وارد حساب کاربری خود شوید

منابع مشابه

نقش شرایط مختلف تجمع آنزیم هگزوکیناز نوع B مخمر در ساختار و سمیت آن روی سلول ها

زمینه و هدف: تشکیل رسوبات پروتئینی آمیلوئیدی از ویژگی های مشترک گروهی از بیماری های وابسته به آمیلوئید از جمله آلزایمر، پارکینسون، دیابت نوع II و پریون می باشد. نوع تجمعات تشکیل شده در شرایط مختلف و مکانیزم تخریب عملکرد سلولی توسط این تجمعات، هنوز کاملاً مشخص نیست. در مطالعه حاضر توانایی هگزوکیناز نوع B مخمر (YHKB) برای تشکیل تجمعات منظم آمیلوئیدی و یا بی شکل در شرایط گوناگون و سمیت این تجمعات ر...

متن کامل

بررسی جایگاه اتصال آنزیم هگزوکیناز روی غشای خارجی میتوکندری در سلول های سرطانی مغز

زمینه و هدف: در سرطان‌های مغز، منبع اصلی انرژی از مسیر گلیکولیز تأمین می‌شود. آنزیم شروع‌کننده این مسیر نیز هگزوکیناز نوع یک (HKI) می‌باشد. این آنزیم در دو جایگاه متفاوت به غشای خارجی میتوکندری متصل می‌شود. آنزیم متصل به جایگاه A به‌وسیله محصولش یعنی گلوکز 6-فسفات (G6P) از جایگاه خود آزاد می‌گردد. آنزیم متصل به جایگاه B به G6P غیرحساس است ولی به‌وسیله غلظت بالایی از نمک کائوتروپ KSCN از جایگاه ...

متن کامل

بررسی جایگاه اتصال آنزیم هگزوکیناز روی غشای خارجی میتوکندری در سلول های سرطانی مغز

زمینه و هدف: در سرطان های مغز، منبع اصلی انرژی از مسیر گلیکولیز تأمین می شود. آنزیم شروع کننده این مسیر نیز هگزوکیناز نوع یک (hki) می باشد. این آنزیم در دو جایگاه متفاوت به غشای خارجی میتوکندری متصل می شود. آنزیم متصل به جایگاه a به وسیله محصولش یعنی گلوکز 6-فسفات (g6p) از جایگاه خود آزاد می گردد. آنزیم متصل به جایگاه b به g6p غیرحساس است ولی به وسیله غلظت بالایی از نمک کائوتروپ kscn از جایگاه ...

متن کامل

اثر سمیت سلولی حلال های مختلف و اسانس اکالیپتوس بر روی سلول های فیبروبلاست انسانی

  زمینه: گزارش­هایی مبنی بر خواص ضد باکتریایی، ضد ویروسی، ضد سرطانی و فعالیت حشره­کشی اسانس­ گونه­های مختلف اکالیپتوس وجود دارد. بیش­تر اسانس­های گیاهی قبل از آزمایش، در حلال­های قطبی یا غیرقطبی حل می شوند.   هدف: مطالعه به منظور تعیین اثر سمیت حلال­های مختلف و اسانس اکالیپتوس بر روی سلول­های طبیعی انجام شد.   مواد و روش­ها: این مطالعه تجربی در سال­های­ 1392 و 1393 در پژوهشکده بیوتکنولوژی سازما...

متن کامل

اثر هیپرتیروئیدیسم تجربی بر فعالیت آنزیم های هگزوکیناز، لاکتات دهیدروژناز و آکونیتاز در مغز Rat در طول رشد

تحقیقات انجام شده بر روی تاثیر هورمون های تیروئیدی در متابولیسم انرژی بیانگر افزایش مصرف اکسیژن در اکثر بافت های بدن می باشد، اما این امر در مغز مشاهده نمی شود. از آنجا که گلوکز منبع اصلی تولید انرژی در مغز است، در این تحقیق اثر هورمون های تیروئیدی بر روی فعالیت آنزیم های هگزوکیناز، لاکتات دهیدروژناز و آکونیتاز همراه با اندازه گیری غلظت گلوکز و گلیکوژن در مغز Rat مورد بررسی قرار گرفت. نتایج نشا...

متن کامل

بررسی غلظت‌های مختلف گلوکز بر سمیت سلولی و افزایش گونه‌های فعال اکسیژن و نقش حفاظتی زعفران در سلول PC12

Background and Objective: Diabetic neuropathy is one of the most frequent complications of diabetes. Despite some studies, the exact mechanism of glucose neurotoxicity has not been fully elucidated. Increased reactive oxygen species (ROS) has been proposed as a possible mechanism. Crocus sativus L. (saffron) has been known as a source of antioxidants. Therefore, neuroprotective effect of saffro...

متن کامل

منابع من

با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید


عنوان ژورنال:
مجله علمی - پژوهشی دانشگاه علوم پزشکی سبزوار

ناشر: دانشگاه علوم پزشکی سبزوار

ISSN 1606-7487

دوره 18

شماره 2 1970

میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com

copyright © 2015-2023